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trv2载体序列 pTRV2 载体图谱和序列

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

载体名称: pTRV2 载体抗性: Kanamycin 载体长度: 9663 bp 载体类型: RNAi plasmid 复制子: ori 启动子: CaMV35S(enhanced) 克隆方法: Enzyme Cut pTRV2 载体图谱 复制序列 NovoBuilder中查看图谱 pTRV29663 bp4008001200160020002400280032003600400044004800520056006000640068007200760080008400880092009600Capsid proteinTRV strain ppk20 RNA2 3'-sequence6xHisNOS terminatorRB T-DNA repeatpVS1 StaApVS1 RepApVS1 oriVbomoriKanRLB T-DNA repeatCaMV 35S promoter (enhanced) 质粒操作方法

1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pTRV2 载体序列

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LOCUS V012780 9663 bp DNA circular SYN 18-SEP-2021 DEFINITION Exported. ACCESSION V012780 VERSION V012780 KEYWORDS pTRV2 SOURCE synthetic DNA construct ORGANISM synthetic DNA construct . REFERENCE 1 (bases 1 to 9663) TITLE Direct Submission REFERENCE 2 (bases 1 to 9663) AUTHORS . TITLE Direct Submission COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article" FEATURES Location/Qualifiers source 1..9663 /mol_type="other DNA" /organism="synthetic DNA construct" CDS 561..1172 /gene="CP" /label="Capsid protein" /note="Capsid protein from Tobacco rattle virus (isolate PpK20). Accession#: Q88897" misc_feature 1709..2103 /label="TRV strain ppk20 RNA2 3'-sequence" /note="TRV strain ppk20 RNA2 3'-sequence" CDS 2164..2181 /label="6xHis" /note="6xHis affinity tag" terminator 2216..2468 /label="NOS terminator" /note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal" misc_feature 2490..2514 /label="RB T-DNA repeat" /note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA" CDS 3814..4440 /label="pVS1 StaA" /note="stability protein from the Pseudomonas plasmid pVS1 (Heeb et al., 2000)" CDS 4877..5941 /label="pVS1 RepA" /note="replication protein from the Pseudomonas plasmid pVS1 (Heeb et al., 2000)" rep_origin 6010..6204 /label="pVS1 oriV" /note="origin of replication for the Pseudomonas plasmid pVS1 (Heeb et al., 2000)" misc_feature 6548..6688 /label="bom" /note="basis of mobility region from pBR322" rep_origin complement(6874..7462) /direction=LEFT /label="ori" /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of replication" CDS complement(7552..8343) /label="KanR" /note="aminoglycoside phosphotransferase" misc_feature 8768..8792 /label="LB T-DNA repeat" /note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA" promoter 8990..9663 /label="CaMV 35S promoter (enhanced)" /note="cauliflower mosaic virus 35S promoter with a duplicated enhancer region"

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