三、实验流程
(1)提取绿叶中的色素——研磨法
称取、剪碎5g叶片,放入研钵中。加入少许二氧化硅、碳酸钙、5mL丙酮。快速、充分研磨。
根据叶绿体中的色素在有机溶剂(乙醇、丙酮等)中溶解的特性,用丙酮可将色素从叶片中提取出来(若用95%的酒精作溶剂,则应向色素提取液中加入无水碳酸钠,除去色素提取液中的水分。若用丙酮作溶剂,则用量不宜过多,以2~5mL为宜,过多会影响色素浓度,过少不易过滤),过滤后收集滤液(将研磨液迅速倒入基部已放—块单层尼龙布的漏斗中过滤),将滤液收集到小试管中,及时用棉塞将试管塞紧备用。注:也可以不过滤,加入适量的丙酮把叶子研磨成糊糊状,再用载玻片(或木工用的竹笔)的一端蘸取研磨液直接点样即可。
(2)制备滤纸条
将干燥过的定性滤纸剪成6 cm×l cm的条,一端剪去两角,距该端lcm处用铅笔画一条极细的横线。用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线,待干燥后再重复画2~3次(次数越多色素越多)。
(3)色素分离------纸层析法
将干燥后的滤纸条画线一端朝下放入有少许 (2~3mL)层析液的烧杯中,盖上培养皿。
(4)观察层析后,取出滤纸条,烘干后观察色素分离情况。
(5)整理、洗手。